@phdthesis{Oevermann2009,
  author    = {Lena Oevermann},
  title     = {Die Expression der ABC-Transporter MRP4 und MRP5 in den h{\"a}matopoetischen Vorstufen der myeloiden Reihe},
  journal    = {Expression of the ABC-transporters MRP4 and MRP5 in hematopoietic progenitors of the myeloid lineage},
  url       = {https://nbn-resolving.org/urn:nbn:de:gbv:9-000673-3},
  year      = {2009},
  abstract  = {Viele periphere Blutzellen exprimieren ABC-Transporter an ihrer Zelloberfl{\"a}che. Insbesondere konnten ABCC4 (MRP4) und ABCC5 (MRP5), die in Plasmamembranen verschiedener peripherer Blutzellen identifiziert wurden, spezifische Funktionen f{\"u}r die entsprechenden Zellpopulationen, wie z.B. die Mediatorspeicherung in den dichten Granula der Thrombozyten zugewiesen werden. Alle reifen Blutzellen stammen von derselben Stammzelle ab, sodass man annehmen muss, dass sich die spezifische Funktionalit{\"a}t und die dazugeh{\"o}rige zellul{\"a}re Ausstattung erst im Verlauf der Differenzierung ausbilden. Inwiefern sich diese Prozesse w{\"a}hrend der Differenzierung auf die Expression und Lokalisation von MRP4 und MRP5 auswirken, wurde bisher nicht untersucht. So wurde im Rahmen dieser Arbeit ein Zellmodell zur Isolierung CD34-positiver h{\"a}matopoetischer Stammzellen aus Nabelschnurblut entwickelt. Dies beinhaltete zudem die Behandlung CD34-positiver Zellen mit bestimmten Wachstumsfaktoren zur Differenzierung in die thrombozyt{\"a}re und die myelomonozyt{\"a}re Richtung. Dar{\"u}ber hinaus wurden die Leuk{\"a}miezelllinien K562 und HL60 mit PMA, DMSO und Butyrat ausdifferenziert. Erstere in Richtung Thrombozyten, letztere in Richtung Makrophagen, Granulozyten und Monozyten. Der Differenzierungsnachweis wurde mittels FACS-Analyse gef{\"u}hrt und die Expression von MRP4 und MRP5 im Anschluss auf mRNA und Protein-Ebene, mittels Real-Time PCR, Immunhistochemie, Western Blot und Akkumulationsassay erforscht. In den thrombozyt{\"a}r differenzierten CD34-positiven Zellen fand sich ein signifikant positiv korreliertes Verh{\"a}ltnis von MRP4 zu CD41a (Glykoprotein IIb/IIIa), hingegen eine negative Korrelation von MRP5 zu CD41a. Au{\"s}erdem konnte im Laufe der Differenzierung in der Immunfluoreszenz eine zunehmende intrazellul{\"a}re Expression von MRP4 und eine Kolokalisation mit LAMP-2, einem Lysosomen- und Dense-Granula-Marker, gezeigt werden. Die myelomonozyt{\"a}ren Zellen wiesen eine signifikante Reduktion an MRP4 und ebenfalls eine Verminderung der MRP5-Expression auf. In der Differenzierung der leuk{\"a}mischen Zelllinien wurde eine generelle Zunahme von MRP4 und MRP5 mit der Entdifferenzierung der Zellen in allen Linien gefunden. Die komplexen Vorg{\"a}nge im Verlauf der menschlichen H{\"a}matopoese umfassen also auch Ver{\"a}nderungen an MRP4- und MRP5-Expression in Qualit{\"a}t und Quantit{\"a}t. Sowohl in der physiologischen als auch in der pathologischen Zellentwicklung findet sich eine Regulation dieser beiden Transporter. Die Ergebnisse der Arbeit st{\"u}tzen die Annahme, dass MRP4 eine wichtige Rolle im Metabolismus der Thrombozyten spielt, hier besonders in der Speicherung und Freisetzung von cGMP, ADP und Serotonin. Die Transporterexpression in den Leuk{\"a}miezelllinien steigt mit der Entdifferenzierung der Zellen. Aus dieser Erkenntnis ergeben sich therapeutische {\"U}berlegungen, Differenzierungsagenzien zur {\"U}berwindung der Multi-Drug-Resistenz mit Chemotherapeutika zu kombinieren.},
  language  = {de}
}