@phdthesis{Busse2017, author = {Franka Busse}, title = {Untersuchung der biologischen Wirkung und deren Bedeutung nach A20-Herunterregulation in peripheren T-Zellen}, journal = {Investigation of the biological effect and its importance after A20 knockdown in peripheral T cells}, url = {https://nbn-resolving.org/urn:nbn:de:gbv:9-002814-8}, year = {2017}, abstract = {Wichtige Signaltransduktionswege der Zelle sind bei malignen Erkrankungen h{\"a}ufig gest{\"o}rt. Ein Beispiel hierf{\"u}r ist der NFkappaB-Signalweg. NFkappaB-Aktivierung kann zur Expression immunmodulatorischer Molek{\"u}le, sowie zu Entz{\"u}ndung und Proliferation von Zellen f{\"u}hren. Das Protein A20 wurde bereits als ein bedeutender Inhibitor im NFkappaB-Weg identifiziert. In Vorarbeiten der Arbeitsgruppe konnte gezeigt werden, dass bei dem kutanen T-Zell-Lymphom, S{\´e}zary-Syndrom, genetische Ver{\"a}nderungen von A20 h{\"a}ufig sind und A20 eine m{\"o}gliche tumorsuppressive Wirkung bei diesem Teil der kutanen T-Zell-Lymphome hat. Um die biologische Bedeutung eines A20-Verlustes in T-Zellen zu pr{\"u}fen, wurden die Effekte von A20-Herunterregulation (Knockdown) in gereinigten peripheren T-Zellen gesunder Blutspender untersucht. Zun{\"a}chst wurde die A20-Expression in nicht stimulierten und stimulierten T-Zellen verglichen. Es zeigte sich im Vergleich auf mRNA-Ebene eine verminderte A20-Expression und ein Anstieg der IL2-Expression nach Stimulation {\"u}ber den T-Zell-Rezeptor. Weiterhin wurde untersucht, welche biologischen Ver{\"a}nderungen sich in T-Zellen gesunder Blutspender nach A20-Herunterregulation durch transiente Transfektion mit siRNA nachweisen lassen. In nicht stimulierten T-Zellen zeigte sich keine messbare biologische Auswirkung des A20-Knockdowns bez{\"u}glich Zellvitalit{\"a}t, Zellzahl und Zellzyklus-Status. Stimulierte T-Zellen hingegen zeigten eine verminderte A20-Expression auf mRNA- und Proteinebene, aber einen deutlichen Anstieg ihrer Replikationsaktivit{\"a}t nach A20-Knockdown. Dies manifestierte sich in einer Akkumulation von Zellen in der S-Phase des Zellzyklus. Der Verlust der A20-Expression in T-Zellen gesunder Probanden f{\"u}hrte zu einer erh{\"o}hten NFkappaB-Aktivit{\"a}t und einem Ansteigen der Proliferation. Diese Daten unterst{\"u}tzen die Hypothese, dass der Verlust von A20 an einer malignen Transformation von T-Zellen beteiligt sein kann.}, language = {de} }