@phdthesis{Kuhnke2007, author = {Diana Kuhnke}, title = {P-Glykoprotein vermittelter Arzneimitteltransport - Untersuchungen zur Interaktion mit Heparin und Beat-Amyloid am epithelialen Zellmodell}, journal = {Drug Transport mediated by P-glycoprotein – interactions with Heparin and Beta-Amyloid investigated in an epithelial cell model}, url = {https://nbn-resolving.org/urn:nbn:de:gbv:9-000360-3}, year = {2007}, abstract = {Das P-Glykoprotein stellt ein wichtiges membran{\"a}res Transportprotein zum Schutz des Organismus vor Xenobiotika sowie toxischen endogenen Metaboliten dar und ist an der Aufrechterhaltung der Barrierefunktion von Blut-Gewebe-Schranken beteiligt. Au{\"s}erdem beeinflussen Pgp-vermittelte Transportvorg{\"a}nge die Pharmakokinetik einiger Arzneimittel. Eine Modulation der Pgp-Funktion ist in vielerlei Hinsicht von Bedeutung. Daher war es Ziel dieser Arbeit, die Interaktionen zweier unterschiedlicher Substanzen, des mit der AD assoziierten Beta-Amyloids und des Arzneistoffes Heparin, mit dem Pgp zu untersuchen und die modulatorischen F{\"a}higkeiten auf die Aktivit{\"a}t des Effluxtransporters in einem Zellsystem zu bewerten. Daf{\"u}r stand eine polar wachsende, mit humanem MDR1-transfizierte Zelllinie zur Verf{\"u}gung, die sich zur Untersuchung des transepithelialen Transportes eignete. Bei der Durchf{\"u}hrung der funktionellen in-vitro-Assays lie{\"s}en sich eine signifikant verst{\"a}rkte Akkumulation, ein signifikant inhibierter apikaler Efflux von Rh123 und die signifikant verminderte ATP-abh{\"a}ngige Rh123-Aufnahme in Membranvesikel in Gegenwart von UFH sowie LMWH im Pgp-{\"u}berexprimierenden Epithelzellmodell nachweisen. Ein direkter Transport markierter Heparine konnte ebenso gezeigt werden. Als Kontrolle dienten zum Einen parentale LLC-PK1, zum Anderen zeigten vergleichende Betrachtungen bekannter Pgp-Modulatoren wie Verapamil oder CsA in diesen Transportversuchen {\"a}hnliche Ergebnisse. Neben inhibitorischen Effekten der Aβ-Peptide auf die Pgp-Funktion konnte ein direkter aktiver Pgp-vermittelter Transport von synthetischem Aβ1-40 und Aβ1-42 gezeigt werden. Sowohl in polarisierten Zellmonolayern aus MDR1-transfizierten LLC-Zellen, die als in-vitro-Modell f{\"u}r das vaskul{\"a}re Endothel der Blut-Hirn-Schranke dienen, als auch in aus den Zellen isolierten Membranvesikeln konnte ein vektorieller bzw. ATP-abh{\"a}ngiger Transport der fluoreszenzmarkierten Peptide nachgewiesen werden. Eine Beteiligung des Pgp wurde anhand der Minderung des Transportes durch den spezifischen Inhibitor CsA verifiziert. Damit stellen sowohl die Heparine als auch die Beta-Amyloide nicht nur Inhibitoren des Pgp-vermittelten Transportes dar, sondern k{\"o}nnen selbst zum breiten Spektrum der affinen Pgp-Substrate gez{\"a}hlt werden. Sie bewirken eine nachgewiesene pharma-kologische Modulation der Pgp-Aktivit{\"a}t und bieten Anhaltspunkte f{\"u}r weitere Untersuchungen der komplexen Funktionen des Transportproteins.}, language = {de} }