@phdthesis{Beyer2015,
  author    = {Georg Beyer},
  title     = {Pr{\"a}klinische Evaluation der Wirksamkeit und des Wirkmechanismus von Triptolid und Minnelide™ im Kolonkarzinom in vivo und in vitro unter besonderer Ber{\"u}cksichtigung des Jak-2/STAT-3-Signalwegs},
  journal    = {Preclinical evaluation of efficacy and mechanism of action of triptolide and Minnelide in colon cancer in vitro and in vivo with special emphasis on Jak-2/STAT-3 signaling},
  url       = {https://nbn-resolving.org/urn:nbn:de:gbv:9-002329-3},
  year      = {2015},
  abstract  = {Einleitung Das kolorektale Karzinom ist eine der h{\"a}ufigsten Tumorerkrankungen der westlichen Welt und die zweith{\"a}ufigste tumorassoziierte Todesursache bezogen auf die Gesamtbev{\"o}lkerung. Im Stadium IV betr{\"a}gt das 5-Jahres{\"u}berleben unbefriedigende 12\%. Minnelide™ ist das wasserl{\"o}sliche Prodrug des pflanzlichen Wirkstoffs Triptolid, der vielversprechende Ergebnisse in der Behandlung des Pankreaskarzinoms zeigt. {\"U}ber die Effektivit{\"a}t von Minnelide™ im Kolonkarzinom und den Mechanismus von Triptolide ist nur wenig bekannt. Material und Methoden Der Einfluss von Minnelide™ auf das Tumorwachstum, das Fortschreiten der Metastasierung und das Gesamt{\"u}berleben wurde in einem subkutanen und einem Lebermetastasen-Xenograftmodell mit humanen HCT116-Zellen in nu/nu-M{\"a}usen untersucht. In vitro Studien zum Mechanismus von Triptolid wurden in HCT116 und HT29 Zelllinien durchgef{\"u}hrt und mit Pankreaskarzinomzelllinien S2-VP10 und MiaPaCa-2 verglichen. Zellviabilit{\"a}t wurde mittels CCK-8, Caspaseaktivit{\"a}t fluorometrisch und der Zellzyklusarrest mittels FACS bestimmt. Autophagie und die Expression von anti-apoptotischen und proliferationsf{\"o}rdernden Proteinen XIAP, Survivin, BCL-Xl, c-Myc, Cyclin D1 und Cdk-4 in Zelllysaten und Tumorhomogenaten wurden im Western Blot bestimmt. C-myc mRNA wurde mittels Real-Time-PCR gemessen. Jak-2-Aktivierung wurde durch Bestimmung von P-Jak-2 im Western Blot bestimmt und die physische Interaktion zwischen Jak-2 und STAT-3 in Co-Immunopr{\"a}zipitationen untersucht. Der Einfluss auf die STAT-3-Aktivit{\"a}t wurde mit STAT-3-Dual-Luciferase-Reporter-Assay erfasst. Als spezifischer Jak2-Inhibitor kam WP1066 zum Einsatz. Ergebnisse Minnelide™ hemmt das Wachstum von subkutanen Tumoren und von Lebermetastasen signifikant und verl{\"a}ngert das {\"U}berleben von M{\"a}usen mit Lebermetastasen. Triptolid f{\"u}hrt dosisabh{\"a}ngig zu Zelltod durch Apoptose und G1-Zellzyklusarrest in dem es die Expression von XIAP, Survivin, BCL-Xl und c-Myc, nicht jdeoch Cyclin D1 und Cdk-4 hemmt. Dies geht mit einem Verlust von P-Jak-2 und STAT-3-Aktivit{\"a}t einher und der Effekt l{\"a}{\"s}t sich durch Verwendung eines Jak2-Inhibitors validieren. Die Inhibtion des Jak-2/STAT-3-Signalweg ist in Kolon- und Pankreaskarzinomzellen gleicherma{\"s}en nachvollziehbar. Diskussion In dieser Arbeit wird gezeigt, dass Minnelide™ in Analogie zu den Ergebnissen in Pankreaskarzinommodellen das Tumorwachstum signifkant hemmt, die Metastasierung bremst und das {\"U}berleben der Versuchstiere verbessert und damit eine vielversprechende Substanz f{\"u}r die Behandlung des metastasierten Kolonkarzinoms darstellt. Weitere Studien zum Vergleich mit Standardsubstanzen und in nicht-immundefizienten Tiermodellen sind jedoch notwendig. Eine Inhibtion von Jak-2 durch Triptolid war bisher weder f{\"u}r das Kolon- noch f{\"u}r das Pankreaskarzinom beschrieben. Jak-2, als Zielstruktur von Triptolid, reiht sich damit in eine st{\"a}ndig wachsende Liste von m{\"o}glichen Wirkmechanismen ein. In welcher Weise Triptolid mit Jak-2 und anderen Signalwegen interagiert, bleibt weiter unverstanden und bedarf weiterer Forschung.},
  language  = {de}
}