@phdthesis{Wichmann2017, author = {Wenke Wichmann}, title = {Der Einflu{\"s} von Glucose und Docosahexaens{\"a}ure auf das Proteom von BRIN-BD11-Insulinomazellen}, journal = {The influence of glucose and docosahexaen acid on the proteom of BRIN-BD11 cells}, url = {https://nbn-resolving.org/urn:nbn:de:gbv:9-opus-20640}, year = {2017}, abstract = {In der vorliegenden Forschungsarbeit wurde untersucht, zu welchen Ver{\"a}nderungen es im Proteom der pankreatischen β-Zelle durch Erzeugung von Hyperglyk{\"a}mie und/oder Hyperlipid{\"a}mie kommt, die z.B. im Rahmen des Metabolischen Syndroms auftreten k{\"o}nnen. F{\"u}r die Experimente wurde die Zelllinie BRIN BD11 verwendet. Eine Behandlung erfolgte vergleichend mit Glucose (25 mM) und/oder Docosahexaens{\"a}ure (DHA 0,1 mM) f{\"u}r 24 Stunden. Das Proteom der BRIN-BD11 Zellen wurde mit Hilfe von 2D Differenzial-Fluoreszenz-Gelelektrophorese (DIGE) analysiert und die Proteine unter Verwendung der Massenspektrometrie identifiziert. Es konnten insgesamt 1101 Proteine in 1487 detektierten Spots bestimmt werden. Darunter stellten sich 90 Spots unter den oben genannten Stimulationen als signifikant reguliert dar. Aus diesen wurden 63 regulierte Proteine identifiziert, die sich verschiedenen Bereichen des Stoffwechsels zuordnen lassen, u.a. dem Glucosestoffwechsel, der Atmungskette, katabolen Prozessen oder den Reparatur- und Schutzmechanismen. Eine Ingenuity Pathway Analyse anhand der regulierten Proteine ergab Zuordnungen zu 3 Netzwerken: 1 Nukleins{\"a}uremetabolismus, Lipidmetabolismus und Biochemie kleiner Molek{\"u}le, 2 DNA -Replikation, -Rekombination und -Reparatur, Nukleins{\"a}uremetabolismus und Biochemie kleiner Molek{\"u}le, 3 Kohlenhydratmetabolismus, molekularer Transport und Biochemie kleiner Molek{\"u}le. Weiterhin konnte eine funktionelle Einteilung sowie die Verteilung der Proteine nach Zellkompartimenten dargestellt werden. Eine Verifizierung der Ergebnisse mittels RT-qPCR erfolgte f{\"u}r Cathepsin D, Endoplasmic reticulum lipid raft-associated protein 2, Melanocyte proliferating gene 1, Glutamat-Cystein-Ligase sowie f{\"u}r die Thioredoxin-Reduktase und das Dihydropyrimidinase-related protein 2. Desweiteren wurden Western Blot Analysen zu Thioredoxin-Reduktase und das Dihydropyrimidinase-related protein 2 durchgef{\"u}hrt. Die Ergebnisse weisen auf eine Regulation im Sinne einer Kompensation der Stressoren hin, die durch gesteigerte Expression/Aktivit{\"a}t antioxidativer Systeme wie Glutathion und Thioredoxin erkl{\"a}rbar w{\"a}ren. Zudem konnte ein Proteommuster der BRIN BD11 Zellen erstellt werden und bildet mit der massenspekrometrischen Identifizierung der Proteine eine Grundlage f{\"u}r weitere Untersuchungen an der Zelllinie.}, language = {de} }