@phdthesis{Rehdorf2010, author = {Jessica Rehdorf}, title = {Discovery of novel Baeyer-Villiger monooxygenases and their application in organic synthesis.}, journal = {Entdeckung neuer Baeyer-Villiger Monooxygenasen und deren Einsatzm{\"o}glichkeiten in der organischen Synthese.}, url = {https://nbn-resolving.org/urn:nbn:de:gbv:9-000740-1}, year = {2010}, abstract = {Innerhalb dieser Arbeit ist es gelungen mittels verschiedener PCR-Methoden eine Baeyer-Villiger Monooxygenase (BVMO) aus genomischer DNA von P. putida JD1 zu amplifiezieren. Das Gen wurde anschlie{\"s}end kloniert und in E. coli {\"u}berexprimiert. Nach Expressionsoptimierung erfolgte die Aufreinigung (Anionenaustauscher und Affinit{\"a}tschromatographie) und die Charakterisierung der neuen BVMO. Dabei zeigte sich, das besonders Acetophenon-Derivate, die den Substituenten in para-Position haben bevorzugt umgesetzt werden. Daneben wurden aber auch Aldehyde und Sulfide oxidiert. Das Temperaturmaximum lag bei 30°C, das pH-Maximum bei 8,5 (in TrisHCl-Puffer). Neben den molekularbiologischen Methoden wurde eine neue Substratklasse f{\"u}r BVMOs etabliert. Daf{\"u}r wurden verschiedene beta-substituierte lineare, aliphatische Ketone chemisch synthetisiert und anschlie{\"s}end in Biotransformationen mit verschiedenen BVMOs in einer kinetischen Racematspaltung untersucht. Dabei zeigte sich, dass N-gesch{\"u}tzte beta-Aminoketone, arylaliphatische Ketone und beta-Hydroxyketone sehr gute Substrate f{\"u}r BVMOs sind (E > 100, bei c = 50\%). Au{\"s}erdem konnte ein neuer enzymatischer Syntheseweg zur Darstellung von enantiomerenreinen 1,2-Diolen und optische aktiver Vorstufen von beta-Aminos{\"a}uren mit BVMOs aufgezeigt werden.}, language = {en} }