@phdthesis{Scheitz2010, author = {Jan Friedrich Scheitz}, title = {Untersuchungen zur Expression und Funktion der Transportproteine MRP4 (ABCC4), MRP5 (ABCC5) und hENT1 (SLC29A1) in der H{\"a}matopoese und deren Bedeutung bei der Behandlung der AML}, journal = {Expression and function of the transport proteins MRP4 (ABCC4), MRP5 (ABCC5) and hENT1 (SLC29A1) during hematopoietic differentiation and their possible role in the treatment of AML}, url = {https://nbn-resolving.org/urn:nbn:de:gbv:9-000850-0}, year = {2010}, abstract = {H{\"a}matopoetische Stammzellen und zahlreiche reife periphere Blutzellen exprimieren Effluxtransporter vom ABC-Typ, darunter auch die Vertreter MRP4 und MRP5. Weiterhin sind Nukleosidtransporter wie hENT1 in vielen Blutzellen nachgewiesen worden. {\"U}ber die Regulation dieser an der Vermittlung von Zytostatikaresistenzen beteiligten Transporter im Verlauf der h{\"a}matopoetischen Differenzierung ist bisher nur wenig bekannt. Um diesen Prozess genauer zu studieren, wurden zun{\"a}chst CD34-postive Blutzellvorl{\"a}ufer aus Nabelschnurblut und reife Monozyten und Granulozyten aus peripherem Blut isoliert und hinsichtlich ihrer Transporterexpression charakterisiert. Anschlie{\"s}end wurden die leuk{\"a}mischen Modellzelllinien HL-60, U-937 und M-07e in vitro zur myelomonozyt{\"a}ren beziehungsweise megakaryozyt{\"a}ren Differenzierung angeregt und die Expression, Lokalisation und Funktion von MRP4, MRP5 und hENT1 w{\"a}hrend dieses Vorgangs per Real-Time PCR, Western Blot, Immunfluoreszenzmikroskopie und Zytotoxizit{\"a}ts-Assay untersucht. Der Erfolg der Differenzierung wurde durchflusszytometrisch mittels spezifischer Oberfl{\"a}chenmarker {\"u}berpr{\"u}ft. Es konnte gezeigt werden, dass MRP4, MRP5 und hENT1 in CD34-positiven h{\"a}matopoetischen Vorl{\"a}uferzellen aus Nabelschnurblut sowie in reifen Monozyten und Granulozyten exprimiert sind. In den Progenitorzellen konnte eine signifikant h{\"o}here MRP4-Expression als in den reifen Blutzellen gefunden werden. Dementsprechend ging auch die modellhafte myelomonozyt{\"a}re Differenzierung der Zelllinien HL-60 und U-937 mit einer signifikanten Reduktion der MRP4-Expression einher. Im Zuge der megakaryozyt{\"a}ren Ausreifung der Zelllinie M-07e hingegen konnte ein signifikanter Anstieg der MRP4-Expression beobachtet werden. Die hENT1-Expression war nach Induktion von Differenzierung signifikant vermindert. Weiterhin konnte nach Induktion von Differenzierung eine signifikante Ver{\"a}nderung der Sensitivit{\"a}t gegen{\"u}ber 6-Mercaptopurin und Cytarabin beobachtet werden. MRP5 blieb unter Differenzierungsbedingungen im Wesentlichen unver{\"a}ndert. Die Ergebnisse legen den Schluss nahe, dass insbesondere MRP4 im Zuge der h{\"a}matopoetischen Differenzierung spezifisch reguliert wird. Der beobachtete Anstieg w{\"a}hrend der Megakaryopoese unterst{\"u}tzt die Vorstellung einer Beteiligung von MRP4 bei der Thrombozytenfunktion. Weiterhin scheint sich die Expression von MRP4 und hENT1 im Zuge der myelomonozyt{\"a}ren Differenzierung zu verringern, was sich auch in Resistenzver{\"a}nderungen gegen{\"u}ber 6-Mercaptopurin und Cytarabin niederschl{\"a}gt. Diese Effekte sollten bei der Entwicklung von neuen Therapieschemata zur Behandlung einer AML ber{\"u}cksichtigt werden, falls eine Applikation von Differenzierungsagenzien in Kombination mit konventionellen Zytostatika vorgesehen ist.}, language = {de} }