@phdthesis{Waack2016,
  author    = {Paul Waack},
  title     = {Strukturelle Untersuchungen von SCO3201, einem Repressor aus der TetR-Familie},
  journal    = {Structural Investigations of SCO3201, a Repressor of the TetR-Family},
  url       = {https://nbn-resolving.org/urn:nbn:de:gbv:9-002445-9},
  year      = {2016},
  abstract  = {Diese Arbeit widmet sich der funktionellen und strukturellen Untersuchung von SCO3201, einem Protein aus der Klasse der TetR-Repressoren, dessen Struktur bisher unbekannt war und das eine geringe sequenzielle {\"A}hnlichkeit zu anderen Mitgliedern seiner Familie besitzt. SCO3201 wurde als Repressorprotein identifiziert, das durch {\"U}berexpression sowohl die Antibiotikaproduktion, als auch die morphologische Differenzierung von Streptomyces coelicolor unterdr{\"u}ckt. In fr{\"u}heren Arbeiten wurde gezeigt, dass SCO3201 an mindestens 16 verschiedene Promotor-Sequenzen binden kann. Das Protein konnte in E. coli exprimiert und anschlie{\"s}end isoliert werden. Wegen des Fehlens geeigneter Strukturmodelle gelang eine Strukturl{\"o}sung mittels Molekularem Ersatz nach erfolgreicher Kristallisation zun{\"a}chst nicht. Mittels Single-Wavelength-Anomalous-Dispersion-Methode konnte die Struktur des teilweise induzierten Proteins jedoch aufgekl{\"a}rt werden. Zudem wurde eine Apo-Form des Proteins kristallisiert und ebenfalls strukturell aufgekl{\"a}rt. Dies erlaubte die Lokalisation der Ligandenbindungstasche und lie{\"s} R{\"u}ckschl{\"u}sse auf die Dom{\"a}nenbewegungen zu, die durch den Prozess der Induktion ausgel{\"o}st werden. Daneben wurde mittels R{\"o}ntgenkleinwinkelstreuung die Struktur von SCO3201 in L{\"o}sung untersucht, um eventuelle Kristallisationsartefakte auszuschlie{\"s}en. Durch den Electrophoretic Mobility Shift Assay (EMSA) wurde au{\"s}erdem die Interaktion zwischen dem Regulator SCO3201 zu seinen Operatoren untersucht.},
  language  = {de}
}