@phdthesis{Davids2013,
  author    = {Timo Davids},
  title     = {Protein-Engineering von Enzymen mit Alpha/Beta Hydrolasefaltung},
  journal    = {Protein Engineering of Alpha/Beta hydrolase fold enzymes},
  url       = {https://nbn-resolving.org/urn:nbn:de:gbv:9-001424-2},
  year      = {2013},
  abstract  = {Alpha/Beta-Hydrolasefaltungsenzyme wie Esterasen, Dehalogenasen oder Epoxidhydrolasen sind Enzyme, die unter anderem zur Detoxifizierung von Umweltschadstoffen und der Synthese von Feinchemikalien eingesetzt werden. In dieser Arbeit wurden die Alpha/Beta-Hydrolasefaltungsenzyme untersucht. Im ersten Teil der Arbeit wurde eine Dehalogenaseaktivit{\"a}t in der Esterase PFE I und der Epoxidhydrolase EchA erzeugt. Dabei wurden die katalytischen Loops und die Cap-Dom{\"a}ne ausgetauscht, sowie ein rationales Design durchgef{\"u}hrt. Mit dem Computerprogramm 3DM wurde des Weiteren die Konsensussequenz von Haloalkandehalogenasen ermittelt und diese in die Esterase PFE I integriert. Zur Untersuchung der geringen promiskuitiven Aktivit{\"a}ten wurden sensitive Aktivit{\"a}tsassays mit isothermaler Titrationskalorimetrie entwickelt. Im zweiten Teil dieser Arbeit wurden zwei kontinuierlich gerichtete Evolutionen durchgef{\"u}hrt. Die ben{\"o}tigten in vivo Mutagenesemethoden und Selektionsassays wurden in dieser Arbeit etabliert. Im Anschluss wurden die Methoden eingesetzt um zum Ersten die Enantioselektivit{\"a}t von Esterasen zu verbessern und zum Zweiten eine Dehalogenaseaktivit{\"a}t in Esterasen und Epoxidhydrolasen zu generieren.},
  language  = {de}
}