TY - THES U1 - Dissertation / Habilitation A1 - Brüsehaber, Elke T1 - Esterasen für die Feinchemie: Untersuchungen zur Schweineleberesterase und zu Enzymen aus dem Metagenom N2 - Esterasen und Lipasen finden große Anwendung für die organische Synthese, da sie ein breites Substratspektrum besitzen, in organischen Lösungsmitteln oftmals stabil sind und hohe Enantioselektivitäten auch gegenüber nicht-natürlichen Substraten erreichen können. Die Schweineleberesterase (PLE) ist die bedeutenste Esterase für die Feinchemie. Für die biotechnologische Anwendung ist jedoch der Extrakt aus Schweinelebergeweben, aufgrund des tierischen Ursprungs und der Heterogenität (Vorkommen von verschiedenen Isoenzymen), eher ungeeignet. In dieser Arbeit wird die erfolgreiche rekombinante Expression der PLE in E. coli, die Optimierung der Kultivierung und die Etablierung eines Fermentationsprozesses beschrieben. Weitere Isoenzyme wurden ebenfalls identifiziert, charakterisiert und biokatalytische Umsetzungen von pharmazeutisch relevanten Substraten, wobei neben den PLE-Varianten auch Enzyme aus dem Metagenom verwendet wurden, durchgeführt. N2 - Esterases and lipases are frequently used biocatalysts because they accept a broad range of substrates, are usually stable in organic solvents, and often show high stereoselectivities even towards non-natural substrates. While a large number of lipases is commercially available, there are only few well explored carboxylesterases, among which pig liver esterase (PLE) plays the most important role in industrial processes owing to its high versatility. PLE is commercially obtained by extraction of the animal tissue. However, problems occur in its application due to the presence of several isoenzymes. In this work, several PLE-isoenzymes could be identified and characterized. Furthermore, the expression of PLE-isoenzymes in E. coli and the establishment of a fermentation process is discribed. In addition, enzymatic conversions of pharmaceutic interesting substrates were investigated using PLE-variants and enzymes from metagenom KW - Carboxylesterase KW - Fermentation KW - Biokatalyse KW - rekombinante Proteinexpression KW - recombinant expression of proteins Y2 - 2009 U6 - https://nbn-resolving.org/urn:nbn:de:gbv:9-000694-7 UN - https://nbn-resolving.org/urn:nbn:de:gbv:9-000694-7 ER -