@phdthesis{Laemmerhirt2019,
  author    = {Felix L{\"a}mmerhirt},
  title     = {Die Rolle von microRNAs in der Chemotherapie-Resistenz des Pankreaskarzinoms},
  journal    = {The role of microRNAs in the chemo-resistance of pancreatic cancer},
  url       = {https://nbn-resolving.org/urn:nbn:de:gbv:9-opus-30455},
  pages     = {90},
  year      = {2019},
  abstract  = {Das Ziel des Projektes war die Untersuchung der erworbenen Chemotherapie-Resistenz des Pankreaskarzinoms gegen{\"u}ber den Zytostatika 5FU und Gemcitabin in Hinblick auf eine potentielle Regulation durch microRNAs. Im ersten Schritt wurden Zelllinien mit einer intrinsischen Sensitivit{\"a}t identifiziert. Sieben etablierte Zelllinien des Pankreaskarzinoms (BXPC-3; COLO 357; PATU8988-S; PATU8988-T; CAPAN-1; MIA-PaCa-2; PANC-1) wurden mit Hilfe einer Annexin-V/DAPI-F{\"a}rbung auf eine 5FU- oder Gemcitabin-induzierte Apoptose untersucht. Vier Zelllinien mit einer intrinsischen Sensitivit{\"a}t (BXPC-3; COLO 357; PATU8988-S; PATU8988-T) konnten identifiziert werden. Es folgte die Etablierung einer sekund{\"a}ren Chemotherapie-Resistenz in diesen sensitiven Zelllinien und die Best{\"a}tigung durch einen Proliferationsassay. Um die Hypothese einer ver{\"a}nderten microRNA-Expression in den sekund{\"a}r resistenten Zelllinien zu untermauern, wurde die Expression der microRNAs miR-21, miR-200b und miR-214 untersucht. Eine ver{\"a}nderte Expression wurde gefunden und eine microRNA-Transkriptom-Analyse folgte. Diese deckte eine aberrante Expression von neun microRNAs (miR-7-5p; miR-23a-3p; miR-24-3p; miR-100-5p; miR-125b- 5p; miR-301a- 3p; miR-3158-5p; miR-3621; miR-3940- 5p) auf. Die Validierung dieser microRNAs via RTPCR zeigte eine {\"U}berexpression von miR-100 und miR-125b in allen resistenten Tumorzellen. Dies ist die erste Studie, welche valide Beweise f{\"u}r die Beteiligung beider microRNAs an der erworbenen Resistenz gegen 5FU und Gemcitabin zeigt. F{\"u}r die Evaluation ihrer biologischen Rolle wurde die miR-100 oder miR-125b durch eine transiente Transfektion in den resistenten Zellen inhibiert. Eine Einschr{\"a}nkung der Viabilit{\"a}t und ein Anstieg der Caspasen 3 und 7 konnte nach Applikation der Zytostatika gesehen werden. Durch einen Proliferationsassay konnte eine langfristige Inhibition des Tumorzellwachstums, des Metabolismus und der Viabilit{\"a}t nach dem Knock-down der microRNAs bewiesen werden. Ein Zytotoxizit{\"a}ts-Assay zeigte, dass die microRNA-Inhibition zu einer Wiederherstellung von Sensitivit{\"a}t und Dosis-Wirkungs-Beziehung gegen{\"u}ber 5FU oder Gemcitabin f{\"u}hrt. Es ist somit gezeigt, dass die miR-100 und miR-125b eine entscheidende Rolle in der Ausbildung einer sekund{\"a}ren Antimetabolit-Resistenz spielen. Ob diese microRNAs als Zielmolek{\"u}l einer zuk{\"u}nftigen Antitumortherapie oder als Screeningparameter genutzt werden k{\"o}nnen, m{\"u}ssen weitere Studien zeigen.},
  language  = {de}
}