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Charakterisierung plasmamembrangebundener Proteasen von Nicotiana tabacum und Hordeum vulgare

  • Es wurden erstmals zwei plasmamembrangebundene Proteaseformen in den Wurzeln der Gerste massenspektrometrisch identifiziert und den Metalloaminopeptidasen der Peptidasefamilien M17 und M24 zugeordnet. Ausgehend von Enzymaktivitätstests mit verschiedenen Substraten und gelelektrophoretischer Fraktionierungen existieren darüber hinaus weitere PM-Proteasen des Aminopeptidase-, Carboxypeptidase- und Endoproteasetyps an der pflanzlichen Plasmamembran (PM). Die untersuchten PM-Proteasen stellen Triton X-114-resistente Proteine dar, die erfolgreich mit Octylglucosid solubilisiert wurden und sowohl an der inneren als auch an der apoplastischen Seite der PM lokalisiert sein könnten. Durch endogene Proteolyse werden andere PM-Proteine wie Aquaporine und P-Typ-H+-ATPasen durch die PM-Proteasen reguliert. Dabei zeigen einige dieser Proteolyseprodukte Proteaseaktivität, die für vier Proteaseformen der Gerste erst nach der Abtrennung von der PM nachweisbar war.
  • We were able to identify two forms of so far unknown plasma membrane-bound proteases in the roots of barley. These two proteases were classified as metalloaminopeptidases and belong to the peptidase families M17 and M24. According to enzyme activity tests with specific substrates and gel electrophoretically fractionation several protease forms are present at the plant plasma membrane (pm). They belong to amino-, carboxy- and also endopeptidases. The characterized pm-proteases are Triton X-114-resistent and were solubilized with the detergent octylglucoside. They are either located at the cytoplasmic or apoplastic side of the pm. With endogenous proteolysis pm-proteases are regulating other pm-proteins like aquaporins or p-type ATPases. Some of the proteolytic products show protease activity. Though, the proteolytic activity of four forms from barley was only measurable after release from the pm.

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Metadaten
Author: Manuela Eick
URN:urn:nbn:de:gbv:9-001364-5
Title Additional (English):Characterization of plasma membrane-bound proteases in Nicotiana tabacum and Hordeum vulgare
Advisor:Prof. Dr. Christine Stöhr
Document Type:Doctoral Thesis
Language:German
Date of Publication (online):2012/12/17
Granting Institution:Ernst-Moritz-Arndt-Universität, Mathematisch-Naturwissenschaftliche Fakultät (bis 31.05.2018)
Date of final exam:2012/11/23
Release Date:2012/12/17
Tag:Metalloaminopeptidase, Proteinreinigung, membrangebunden
membrane-bound, metalloaminopeptidase, protein purification
GND Keyword:Gerste, LC-MS, Plasmamembran, Proteasen, Proteolyse, Solubilisation, Tabak, Wurzel
Faculties:Mathematisch-Naturwissenschaftliche Fakultät / Institut für Botanik und Landschaftsökologie & Botanischer Garten
DDC class:500 Naturwissenschaften und Mathematik / 580 Pflanzen (Botanik)