Johannes-Moritz von Behren

• Thrombozyten sind als zelluläres Element für den Schritt der primären Hämostase der Blutgerinnung verantwortlich. Thrombozytenkonzentrat-Transfusionen sind bei der Vorbeugung und Behandlung von thrombozytär bedingten Blutungen indiziert. Thrombozytenkonzentrate werden aus Vollblutspenden (Pooling) oder durch ein automatisches Verfahren (Apherese) gewonnen. Neue Herstellungsmethoden müssen zur Validierung in-vivo getestet werden. Nach einer Markierung werden die Thrombozyten gesunden Probanden transfundiert, um ihre Wirksamkeit zu prüfen. Die radioaktive Markierung, lange Zeit der Goldstandard für die Markierung von Thrombozyten, wird für diesen Zweck nicht mehr akzeptiert. Als nicht-radioaktive Alternative war die Markierung von Thrombozyten mit dem Fluoreszenzfarbstoff Indocyaningrün (ICG) das Ziel dieser Arbeit. Aufgrund einer langjährigen klinischen Anwendung am Menschen und allenfalls seltenen allergischen Reaktionen hat ICG ein gutes Sicherheitsprofil und ist von internationalen Arzneimittelbehörden und auf lokalen europäischen Ebenen zugelassen. Thrombozytenkonzentrate wurden GMP konform mit ICG markiert. Die Markierung in einer Lagerungslösung aus 100% PAS-E (platelet additive solution-E) mit einer ICG-Konzentration von 10 µM lieferte die besten Ergebnisse. Vollblut wurde als Medium verwendet, um die natürliche Thrombozyten-Umgebung zu imitieren und mögliche ICG-Übertritte zwischen beiden Thrombozytenpopulationen (ICG-markierte Thrombozyten aus TKs und Vollblutthrombozyten) zu bewerten. Die ICG-Markierung war stabil und die auf dem ICG-Signal basierte Differenzierung zwischen beiden Populationen blieb über 24 Stunden erhalten. Diese Methode zur Markierung von Thrombozyten mit ICG stellt einen Konzeptnachweis für eine in-vivo-Studie dar. Eine klinische Studie der Phase-Ia mit gesunden Probanden ist geplant, um die Gültigkeit der in-vitro Daten zu überprüfen. Mit dem erfolgreichen Überleben von Thrombozyten in-vivo wäre der Weg für die Untersuchung neuartiger TK-Herstellungsverfahren geebnet.