Stefanie Tania Schuller

• Das hepatozelluläre Karzinom (HCC) ist mit einem Anteil von etwa 75% der häufigste Typ des primären Leberkrebses. Weltweit stellt das HCC die dritthäufigste krebsbedingte Todesursache dar. Der Tumorsuppressor P53, häufig im HCC mutiert, reguliert ein weitreichendes Netzwerk an Genen, darunter die epigenetische Helikase HELLS. In der vorliegenden experimentellen Arbeit wurde der molekulare Mechanismus der P53- abhängigen Regulation der Chromatinstruktur-modulierenden Helikase HELLS untersucht. Dazu wurden siRNA-vermittelte Knockdown-Experimente, Western-Blot-Analysen, Chromatin-Immunpräzipitationen (ChIP) sowie quantitative Real-Time-PCR an Lebertumor-Zelllinien (HepG2, HUH6, SkHep1, HLE, HLF und HUH7) durchgeführt. Zunächst konnte mit Knockdown Untersuchungen gezeigt werden, dass die P53-induzierte Repression von HELLS zumindest partiell durch P21 (=CDKN1A, einem wichtigen P53 Zielgen) vermittelt wird. Über Mikroarray-basierte Expressionsanalysen wurde dann FOXM1 als potentiell relevanter Transkriptionsfaktor bei der P53/P21-vermittelten HELLS Regulation identifiziert. Im Weiteren erfolgte über direkte FOXM1-Knockdown- und Überexpressionsversuche sowie über ChIP-Analysen der Nachweis einer direkten Regulation von HELLS durch FOXM1 in Lebertumorzellen. Diese experimentellen Daten unterstützen die Hypothese, dass die P53/P21-vermittelte Repression von HELLS über eine verminderte Expression von FOXM1 als direktem Transkriptionsfaktor von HELLS im HCC erfolgt. Ergänzend ergaben Expressionsanalysen von humanen HCC Proben eine hochsignifikante positive Korrelation zwischen HELLS- und FOXM1-mRNA-Leveln sowie eine deutliche Überexpression beider Faktoren im HCC im Vergleich zu nicht-tumorösen Lebergewebe. Zudem konnten in Mammakarzinom- (MCF7) und Lungenkarzinom-Zelllinien (A549) ähnlich experimentelle Daten erhoben werden, die nahelegen, dass die regulatorische P53/P21/FOXM1/HELLS-Achse auch auf andere Tumorentitäten übertragen werden kann.