Interfakultäres Institut für Genetik und Funktionelle Genomforschung (MNF)
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Mycobacterium tuberculosis (Mtb) poses a significant global health threat, necessitating the identification of protective immune responses across various host species to facilitate eradication efforts through novel vaccine strategies. While it is known that secretion of the cytokine interferon-gamma (IFNγ) by T cells is a primary anti-mycobacterial response across mammals with varying susceptibility to Mtb, knowledge about the downstream effects of IFNγ on macrophages from natural hosts and species-specific differences is incomplete. In this study, we systematically compared the IFNγ-mediated protection by primary macrophages from humans, cattle, and mice against Mtb. Utilizing Mtb growth assays, high-content microscopy, functional assays, RNAseq, and qPCR, we elucidated the similarities and differences in protective immune responses.
Our findings reveal that under comparable culture conditions, IFNγ induced a pro-inflammatory CXCL10-secreting macrophage phenotype in all three species, with numerous genes enriched responsible for pathogen detection, downstream signal transduction, and production of pro-inflammatory cytokines and chemokines. However, while IFNγ restricted intracellular Mtb growth in murine and bovine macrophages, it showed limited efficacy in human macrophages. Transcriptome analysis uncovered significant differences in IFNγ-mediated gene regulation among the species. Notably, ~77.7% of differentially expressed orthologous genes were species-specific upon IFNγ-stimulation and Mtb infection. Among these, numerous genes associated with the JAK-STAT signaling pathway. In particular, the transcription of NOS2 showed the most notable difference, with murine and bovine macrophages upregulating its transcription, while human macrophages did not. Different transcription of NOS2 was confirmed at the protein level and in functional assays, indicating conserved differential activation of NOS2, which was also confirmed additionally in freshly isolated monocytes and ex vivo activated alveolar macrophages across studied species.
In conclusion, our data suggest that IFNγ responses induce unique molecular processes despite a universal transcriptional immune response in macrophages and monocytes from the murine, human, or bovine host. These findings not only enhance our understanding of protective immunity against Mtb but also have implications for vaccine design. The necessity to investigate protective immune responses against Mtb in diverse natural hosts and experimental models is underscored, emphasizing the importance of considering species-specific responses in developing effective TB interventions.
Background
Streptococcus dysgalactiae subspecies equisimilis (SDSE) is increasingly recognized as an emerging cause of invasive diseases including necrotizing soft tissue infections (NSTIs). In contrast to the closely related Streptococcus pyogenes , SDSE infections mainly affect older and comorbid patients. Biofilm formation has been demonstrated in soft tissue biopsies of S. pyogenes NSTI cases.
Results
Here, we show that bacterial aggregations indicative of biofilms are also present in SDSE NSTI. Although streptokinase (Ska) activity and biofilm formation did not correlate in a diverse set of clinical SDSE isolates, addition of exogenous Ska at an early time point prevented biofilm formation for selected strains. Deletion of ska in SDSE S118 strain resulted in increased biofilm forming capacity. Ska-deficient mutant strain was characterized by a higher metabolic activity and consequent metabolome profiling of biofilms identified higher deposition of a wide range of metabolites as compared to the wild-type.
Conclusions
Our results argue that Ska suppresses biofilm formation in SDSE independent of its original plasminogen converting activity. However, the impact of biofilms and its consequences for patient outcomes in streptococcal NSTIs remain to be elucidated.
The studies presented here in this thesis investigated the complex interplay of the human respiratory tract pathogens S. pneumoniae, S. aureus and IAV with human APCs from two different perspectives. On the one hand, our findings demonstrated that pneumococci were able to completely suppress the function of moDCs and alter the subsequent activation of T cells. This immune evasion strategy is mainly based on the release of the pneumococcal virulence factor Ply. Furthermore, pneumococcal lipoproteins are becoming increasingly prominent as potential new serotype independent vaccine candidates. We show the favorable basic potential of the pneumococcal lipoprotein DacB and the significant impact of the attachment of a lipid moiety in a human context. Both, the lipidated version of DacB and MetQ, demonstrated robust activation of human APCs and further induced the proliferation of human CD4+ T cells underscoring the potential adjuvant properties of the lipid moiety.
Staphylococcus aureus (S. aureus) is a Gram-positive bacterium known to colonize parts of the human population persistently at various niches on the body surface, with the nares as main area of colonization [Wertheim 2004]. In a 19-month longitudinal study at the Statens Serum Institut in 1995, different modes of colonization were described: 14.4% of the 104 persons investigated were characterized as persistent carriers showing detectable amounts of S. aureus in over 90% of swabs, 16.3% as intermittent carriers (over 50% of swabs positive for S. aureus), 52.9% as occasional carriers (over 10% of swabs positive) and 16.3% as non-carriers with not a single culture-positive swab [Eriksen 1995]. With the introduction of more sensitive culture-independent detection technologies, the separation of groups was rephrased in 2009 by van Belkum et al.: only two groups, namely persistent colonization and intermittent carriage should remain due to similar responses of intermittent carriers and non-carriers to artificial inoculation [van Belkum 2009]. Colonization itself can remain unnoticed since no clinical symptoms are triggered, but due to the constant challenge with the bacterium, an increased risk of surgical site infections (SSIs) was described in persistent carriers [Kluytmans 1995]. Additionally, invasive events occur more often, when staphylococci are able to enter the organism e. g. via micro-lesions in the skin [Wertheim 2004]. Due to the persistent challenge in carriers, it was hypothesized that these individuals should reflect these circumstances with higher titers of anti-staphylococcal antibodies together with matching B- and T-cells primed to staphylococcal antigens [Wertheim 2004, Holtfreter 2006]. This idea was addressed in multiple small case-control studies [Verkaik 2009, Dryla 2005, Rigat 2019], but the bigger picture studying the general population was still missing.
The work described in this dissertation focuses on the detection of specific antibodies against a set of 79 staphylococcal antigens in a multiplex bead-based assay format to describe the anti-staphylococcal antibody repertoire in a study population resembling the general population. To achieve this goal, a highly sensitive analysis strategy was designed which is described in the first publication of this thesis “Technical report: xMAPr - High-dynamic-range (HDR) quantification of antigen-specific antibody binding”. This report addresses the challenge of measuring over the wide dynamic range expected in the plasma samples of the Study of Health in Pomerania (SHIP), of which the SHIP-TREND cohort was used as a population-based cohort for the second publication “A Comprehensive View on the Human Antibody Repertoire Against Staphylococcus aureus Antigens in the General Population”. The resulting antibody dataset was added to the multi-factor analyses of the SHIP-TREND cohort allowing a correlation of the individual anti-staphylococcal antibody response to the genetic features of the study subjects in a genome-wide association study (GWAS). The findings concerning one of the included antigens “toxic shock syndrome toxin 1” (TSST-1) are described in the third publication “Toxin exposure and HLA alleles determine serum antibody binding to toxic shock syndrome toxin 1 (TSST-1) of Staphylococcus aureus”. The xMAPr assay setup can be applied to further fields of research where a quantitative antibody detection is needed, e. g. the induction of specific antibodies after vaccination as shown in the fourth publication “Intranasal Vaccination With Lipoproteins Confers Protection Against Pneumococcal Colonisation”, where mice were immunized with antigens derived from Streptococcus pneumoniae.
ATP-binding cassette (ABC) transport systems are crucial for bacteria to ensure sufficient uptake of nutrients that are not produced de novo or improve the energy balance. The cell surface of the pathobiont Streptococcus pneumoniae (pneumococcus) is decorated with a substantial array of ABC transporters, critically influencing nasopharyngeal colonization and invasive infections. Given the auxotrophic nature of pneumococci for certain amino acids, the Ami ABC transporter system, orchestrating oligopeptide uptake, becomes indispensable in host compartments lacking amino acids. The system comprises five exposed Oligopeptide Binding Proteins (OBPs) and four proteins building the ABC transporter channel. Here, we present a structural analysis of all the OBPs in this system. Multiple crystallographic structures, capturing both open and closed conformations along with complexes involving chemically synthesized peptides, have been solved at high resolution providing insights into the molecular basis of their diverse peptide specificities. Mass spectrometry analysis of oligopeptides demonstrates the unexpected remarkable promiscuity of some of these proteins when expressed in Escherichia coli, displaying affinity for a wide range of peptides. Finally, a model is proposed for the complete Ami transport system in complex with its various OBPs. We further disclosed, through in silico modelling, some essential structural changes facilitating oligopeptide transport into the cellular cytoplasm. Thus, the structural analysis of the Ami system provides valuable insights into the mechanism and specificity of oligopeptide binding by the different OBPs, shedding light on the intricacies of the uptake mechanism and the in vivo implications for this human pathogen.
Abstract
Background
Streptococcus pyogenes (group A streptococcus, GAS) causes a variety of diseases ranging from mild superficial infections of the throat and skin to severe invasive infections, such as necrotizing soft tissue infections (NSTIs). Tissue passage of GAS often results in mutations within the genes encoding for control of virulence (Cov)R/S two component system leading to a hyper-virulent phenotype. Dendritic cells (DCs) are innate immune sentinels specialized in antigen uptake and subsequent T cell priming. This study aimed to analyze cytokine release by DCs and other cells of monocytic origin in response to wild-type and natural covR/S mutant infections.
Methods
Human primary monocyte-derived (mo)DCs were used. DC maturation and release of pro-inflammatory cytokines in response to infections with wild-type and covR/S mutants were assessed via flow cytometry. Global proteome changes were assessed via mass spectrometry. As a proof-of-principle, cytokine release by human primary monocytes and macrophages was determined.
Results
In vitro infections of moDCs and other monocytic cells with natural GAS covR/S mutants resulted in reduced secretion of IL-8 and IL-18 as compared to wild-type infections. In contrast, moDC maturation remained unaffected. Inhibition of caspase-8 restored secretion of both molecules. Knock-out of streptolysin O in GAS strain with unaffected CovR/S even further elevated the IL-18 secretion by moDCs. Of 67 fully sequenced NSTI GAS isolates, 28 harbored mutations resulting in dysfunctional CovR/S. However, analyses of plasma IL-8 and IL-18 levels did not correlate with presence or absence of such mutations.
Conclusions
Our data demonstrate that strains, which harbor covR/S mutations, interfere with IL-18 and IL-8 responses in monocytic cells by utilizing the caspase-8 axis. Future experiments aim to identify the underlying mechanism and consequences for NSTI patients.
Klebsiella pneumoniae (K. pneumoniae) ist ein Gram-negatives, fakultative anaerobes, stäbchenförmiges Bakterium, dass ubiquitär in der Umwelt vorkommen kann. Als human-pathogener Erreger ist es in der Lage, die humane Schleimhaut zu kolonisieren und eine Vielfalt von Infektionen auszulösen. Neben nosokomialen Infektionen, Harnwegs- und Blutbahninfektionen werden auch Lungenentzündungen verursacht. Hypervirulente Stämme zeigen einen stark mukoiden Phänotyp und können auch Weichteilinfektionen, Leberabszesse und bakterielle Meningitis verursachen. Durch die rasch steigende globale Verbreitung multiresistenter K. pneumoniae Stämme und dem gleichzeitigen Mangel von alternativen Therapieformen steigt auch die Notwendigkeit, neue Präventions- und Therapiemaßnahmen gegen eine K. pneumoniae Infektion zu entwickeln. Mögliche Präventionsmaßnahmen könnten Impfungen darstellen, die meist auf der Nutzung von Proteinen der Pathogenen basiert. Dabei sind in den letzten Jahren sowohl bei Gram-positiven Bakterien wie Streptococcus pneumoniae (S. pneumoniae), als auch Gram-negativen Bakterien wie Neisseria meningitidis (N. meningitidis) Lipoproteine, welche sich auf der bakteriellen Oberfläche befinden, in den Fokus der Impfstoff-Studien gerückt. Ob Lipoproteine auch bei K. pneumoniae einen protektiven Effekt besitzen und somit als Impfstoff-Kandidaten in Frage kommen, ist noch nicht ausreichend untersucht worden. Zu diesem Zwecke wurden in dieser Arbeit zunächst die Lipoproteine von K. pneumoniae ATCC BAA2146 (Kpn2146) in in silico Analysen identifiziert. Von den 93 potentiellen Lipoproteinen wurden 85 Kandidaten in der äußeren Membran vorhergesagt. Von den Kandidaten wurden 32 Proteine aufgrund ihrer Größe (mindestens 150 Aminosäuren) und ihrer bekannten bzw. auch ihrer unbekannten Funktion in weiterführende Studien aufgenommen. Für eine funktionelle Charakterisierung wurden auf Grundlage der Lipoprotein-kodierenden Genen und unter dem Ausschluss der für Lipoproteine charakteristischen Lipobox die Lipoproteine HP7, HslJ, LpoB, MltA, NlpD_1, NlpD_2, NlpI, Pal, QseG, RlpA, Slp und YajI heterolog in E. coli exprimiert. Die rekombinanten Proteine wurden in Immunisierungen von CD1 Mäusen zur Gewinnung von Antiseren gegen die jeweiligen Proteine und in Immunogenitätsstudien mit humanen Seren gesunder Spender und K. pneumoniae-infizierter Patienten eingesetzt. NlpD_1 und NlpD_2 zeigten immunogenes Potential. Antikörper gegen NlpD_1 und Nlp_D2 konnten sowohl in Seren gesunder Spender als auch in Seren von K. pneumoniae infizierten Patienten nachgewiesen werden. Die Oberflächenassoziation der Lipoproteine von K. pneumoniae wurde mit den anti-Lipoprotein IgGs und einer generierten unbekapselten Mutante Kpn2146Δwza in durchflusszytometrischen Analysen analysiert. Die niedrigen gemessenen Fluoreszenzintensitäten haben keinen eindeutigen Schluss auf eine Lokalisation der Lipoproteine auf der extrazellulären Bakterienoberfläche zugelassen.
Für in vitro und Bindungsstudien wurde die kapsellose Mutante Kpn2146Δwza generiert. Diese Mutante wurde in der vorliegenden Arbeit auch eingesetzt, um den Einfluss der Polysaccharidkapsel auf die Adhäsion, das Überleben im Blut und die Invasivität von K. pneumoniae in einem experimentellen Infektionsmodell zu untersuchen. Die Kapsel-defiziente Mutante zeigte ein verringertes Wachstum im Komplexmedium, während es im chemisch definierten Medium keinen Wachstumsunterschied zwischen Wildtyp und der Mutante gab. Die Adhärenz der kapsellosen Mutante Kpn2146Δwza an A549 Lungenepithelzellen war identisch zum Wildtyp. Dagegen wurde eine erhöhte Internalisierung der Mutante Kpn2146Δwza im Vergleich zum Wildtyp nachgewiesen. Die Überlebensstudien von Kpn2146 und der Kapsel-defizienten Mutante in humanem Vollblut zeigten, dass die unbekapselte Mutante weder im Vollblut noch im menschlichen Plasma überleben konnte. Diese Daten wiesen darauf hin, dass die Kapsel für das Überleben, den Schutz von K. pneumoniae vor der Erkennung und Beseitigung durch das menschliche Immunsystem sowie die Komplement-vermittelte Opsonisierung und Eliminierung unerlässlich ist. Infektionen von Galleria mellonella-Larven zeigten ein deutlich verringertes Virulenzpotential der Kapsel-defizienten Mutante. Insgesamt zeigen diese Daten, dass die bakterielle Polysaccharidkapsel eine entscheidende Rolle in en Infektionen und der Immunevasion von K. pneumoniae spielt.
Die Dynamik der eukaryotischen Chromatinstruktur beeinflusst maßgeblich die Zugänglichkeit der DNA für die Transkriptionsmaschinerie, wobei Histone und DNA entweder direkt chemisch modifiziert werden oder die Position und Zusammensetzung der Nukleosomen moduliert wird. Chromatinremodellierungskomplexe wie SWI/SNF, RSC und INO80 sind für die Umstrukturierung des Chromatins verantwortlich, da sie ATP-abhängig Nukleosomen repositionieren und dadurch Promotorregionen zugänglich machen, sodass Transkriptionsstartstellen freigelegt werden, welche für die Initiierung der Transkription essenziell sind. Sie stehen dabei in direktem Kontakt mit den Transkriptionsaktivierungsdomänen (TADs) transkriptioneller Aktivatoren, wodurch es den Chromatinremodellierungskomplexen möglich ist, die Transkription spezifischer Gene über das Verschieben von Nukleosomen oder den Austausch von Histonvarianten zu regulieren. In dieser Arbeit wurde das komplexe Wechselwirken verschiedener Chromatinremodellierungskomplexe mit transkriptionellen Aktivatoren der Hefe Saccharomyces cerevisiae untersucht. Dabei standen insbesondere der Aktivator der Phospholipid-Biosynthese Ino2 und das humane Protoonkoprotein c-Myc im Fokus. Die beiden Aktivatoren ähneln sich in ihrer Struktur und sind zur DNA-Bindung auf ihre jeweiligen Partner Ino4 bzw. Max angewiesen. Es wurde gezeigt, dass der transkriptionelle Säuger-Aktivator c-Myc über seine beiden N-terminalen TADs auch Kontakt zu zahlreichen Coaktivatoren der Hefe aufnehmen kann. Obwohl c-Myc/Max eine signifikante Genaktivierung durch die Ino2/Ino4-Bindestelle ICRE („inositol/choline response element“) vermitteln kann, reicht diese nicht aus, um einen Verlust vonIno2/Ino4 in der Hefe zu kompensieren, trotz der Interaktion mit Hefe-Coaktivatoren. In dieser Arbeit wurde durch affinitätschromatographische GST-„Pulldown“ Untersuchungen gezeigt, dass sowohl die ATPase Swi2 als auch die Untereinheiten Swi1, Snf5 und Snf6 des Chromatinremodellierungskomplexes SWI/SNF mit beiden TADs von Ino2 wechselwirken können. Für Swi1, Swi2 und Snf5 wurden Aktivatorbindedomänen (ABDs) präzise kartiert. Diese redundanten Interaktionen erklären, weshalb die Deletion der ABD von Swi2 zu keinem Funktionsverlust des Komplexes führt. Ferner wurde durch Chromatin-Immunopräzipitation (ChIP) gezeigt, dass Swi2 in Abhängigkeit des Aktivators Ino2 an ICRE-haltigen Promotoren vorliegt. Da auch die Chromatinremodellierungskomplexe RSC und INO80 in der Lage sind, Nukleosomen zu verschieben, wurden etwaige Aktivatorkontakte der entsprechenden ATPasen Sth1 und Ino80 in dieser Arbeit genauer betrachtet. Für beide ATPasen konnten Kontakte zu Ino2 sowie zu weiteren Aktivatoren nachgewiesen und die verantwortliche ABD kartiert werden. Deletionsstudien zeigten, dass die ABDs beider ATPasen für die biologische Funktion der jeweiligen Komplexe essentiell sind, wenngleich nicht völlig ausgeschlossen ist, dass die Funktionsverluste auf fehlerhafter Assemblierung der Komplexe beruhen. Für Sth1 konnte durch den Austausch evolutionär konservierter basisch/hydrophober Aminosäuren ein ABD-Kernbereich identifiziert werden, der für die Funktion des Komplexes in vivo und in vitro essentiell ist. Bei Ino80 könnte der Funktionsverlust zudem auf die Überlappung seiner ABD mit anderen funktionellen Domänen (Bindung an DNA bzw. Actin) zurückzuführen sein.
Neben der Chromatinremodellierung ist auch die Modifizierung der Histone, z. B. die Histonacetylierung durch die Komplexe SAGA oder NuA4, ein zentraler Aspekt der Chromatindynamik. In dieser Arbeit wurde daher auch die Bindung von Ino2 an die strukturgebende Untereinheit Tra1 von SAGA und NuA4 untersucht. Tra1 ist in der Lage, über eine Solenoid-Struktur seiner repetitiv aufgebauten HEAT-Domäne Aktivatoren zu binden. Es wurde gezeigt, dass auch Ino2 an diese HEAT-Domäne bindet. Im Gegensatz zur Aktivatorbindung von Chromatinremodellierungskomplexen ist diese jedoch keiner spezifischen ABD im klassischen Sinne zuzuordnen, sondern stattdessen von einer Mindestanzahl an Repetitionen abhängig. Die HEAT-Domäne könnte daher als universelle Plattform für Aktivatorkontakte fungieren.
Diese Arbeit beleuchtet die vielfältigen Interaktionen zwischen genspezifischen Transkriptions-faktoren und Coaktivatoren. Es wurde gezeigt, dass Ino2 über seine TADs sowohl die ATPasen verschiedener Chromatinremodellierungskomplexe als auch weitere Untereinheiten des SWI/SNF-Komplexes binden kann, während andere Transkriptionsfaktoren ihre Bindungspartner mannigfaltig variieren. Ferner zeigt diese Arbeit, dass saure TADs auch artübergreifend mit Coaktivatoren interagieren können, was auf flexible Bindungsmechanismen und variable Konformationszustände der TADs hinweist. Diskutiert wird derzeit, welche strukturellen und biochemischen Eigenschaften der TADs ihren Bindungscharakter bestimmen. Insgesamt unterstreicht diese Arbeit die hohe Plastizität der TADs sowie ihr vielgestaltiges Wechselwirken mit den ABDs der Coaktivatoren, was für die Regulation der Genexpression entscheidend ist.
With 2.56 million deaths worldwide annually, pneumonia is one of the leading causes of death. The most frequent causative pathogens are Streptococcus pneumoniae and influenza A virus. Lately, the interaction between the pathogens, the host, and its microbiome have gained more attention. The microbiome is known to promote the immune response toward pathogens; however, our knowledge on how infections affect the microbiome is still scarce. Here, the impact of colonization and infection with S. pneumoniae and influenza A virus on the structure and function of the respiratory and gastrointestinal microbiomes of mice was investigated. Using a meta-omics approach, we identified specific differences between the bacterial and viral infection. Pneumococcal colonization had minor effects on the taxonomic composition of the respiratory microbiome, while acute infections caused decreased microbial complexity. In contrast, richness was unaffected following H1N1 infection. Within the gastrointestinal microbiome, we found exclusive changes in structure and function, depending on the pathogen. While pneumococcal colonization had no effects on taxonomic composition of the gastrointestinal microbiome, increased abundance of Akkermansiaceae and Spirochaetaceae as well as decreased amounts of Clostridiaceae were exclusively found during invasive S. pneumoniae infection. The presence of Staphylococcaceae was specific for viral pneumonia. Investigation of the intestinal microbiomés functional composition revealed reduced expression of flagellin and rubrerythrin and increased levels of ATPase during pneumococcal infection, while increased amounts of acetyl coenzyme A (acetyl-CoA) acetyltransferase and enoyl-CoA transferase were unique after H1N1 infection. In conclusion, identification of specific taxonomic and functional profiles of the respiratory and gastrointestinal microbiome allowed the discrimination between bacterial and viral pneumonia.
Um ein besseres Verständnis von den komplexen regulatorischen Netzwerken der Stressantworten
von B. subtilis zu bekommen, ist es von entscheidender Bedeutung, die entsprechenden
Anpassungsstrategien umfassend zu untersuchen. Die allgemeine Stressantwort dient als essentielle
Reaktion auf verschiedene Stress- und Hungerbedingungen in B. subtilis. Die physiologische
Adaptation, vermittelt durch die Induktion von über 150 allgemeinen Stressgenen durch den
Masterregulator SigB, bietet sowohl spezifischen Schutz vor akuten Stressoren als auch einen
protektiven Schutzmechanismus gegen zukünftige Stressfaktoren oder Nährstoffmangel. Die Aktivität
des alternativen Sigmafaktors SigB wird strikt kontrolliert und durch physikalische Stressoren wie Hitze,
Kälte, Ethanol, osmotischer und oxidativer Stress sowie Energieknappheit stimuliert. Trotz jahrelanger
Forschung zur allgemeinen Stressantwort in B. subtilis sind wichtige Aspekte noch immer nicht
verstanden. Dies trifft besonders auf die molekularen Mechanismen, die die Untergruppen des SigBRegulons
regulieren, und deren Integration in das komplexe Genregulationsnetzwerk der Zelle zu.
Daher war die Zielsetzung im Rahmen dieser Doktorarbeit einen wesentlichen Beitrag zur
Untersuchung von drei verschiedenen molekularen Mechanismen der SigB-abhängigen Genregulation
in B. subtilis als Reaktion auf unterschiedlichen Stressoren zu leisten:
1. Aufklärung des ersten licht- und strahlungsinduzierten Phänotyps in B. subtilis und
Charakterisierung des Zusammenspiels der Masterregulatoren SigB und ComK auf molekularer
Ebene (zur Veröffentlichung angenommen in mBio).
2. Charakterisierung einer konservierten cis-regulatorischen Operatorsequenz, die als
potenzielle Bindestelle für den Modulator der generellen Stressantwort MgsR als Reaktion auf
sekundären oxidativen Stress dient (eingereicht in Nucleic Acids Research).
3. Beschreibung einer neuen Rolle der ClpX ATPase als zentraler Bestandteil der CtsRFunktionalisierung
und damit der CtsR-abhängigen Genregulation unter
Hitzestressbedingungen (unveröffentlichte Arbeit).