Refine
Document Type
- Article (1)
- Doctoral Thesis (1)
Has Fulltext
- yes (2)
Is part of the Bibliography
- no (2)
Keywords
- - (1)
- <i>Streptococcus pneumoniae</i> (1)
- Lipoproteine (1)
- Pneumokokken (1)
- Vakzin (1)
- immune response (1)
- lipidation (1)
- lipoproteins (1)
- pneumococcal colonization (1)
- protection (1)
- vaccine (1)
Institute
Publisher
- MDPI (1)
Untersuchungen zur Immunantwort gegen potenzielle Vakzinkandidaten von Streptococcus pneumoniae
(2022)
Das Gram-positive Bakterium Streptococcus pneumoniae (Pneumokokken) stellt vor allem bei der sehr jungen und älteren sowie immungeschwächten Bevölkerung einen immer mehr an Bedeutung gewinnenden Krankheitserreger dar. Krankheitsbilder wie die Pneumokokken-Meningitis, -Pneumonie und -Sepsis, um nur einige zu nennen, können z.T. schwere Verläufe nehmen. Neue Serotyp-unabhängige Impfstoffe sollen flächendeckenden Schutz vor Infektionen mit S. pneumoniae bieten. Das Hauptaugenmerk der Impfstoffforschung liegt unter anderem auf der Untersuchung von Pneumokokken Protein-basierten Impfstoffen als Bestandteil eines Konjugat- bzw. Multikomponenten Impfstoffes. In diesem Zusammenhang wurde in dieser Arbeit die Immunantwort humaner Immunzellen gegenüber den vier Pneumokokken Oberflächen-Lipoproteinen MetQ, DacB, PnrA und PsaA untersucht. Diese Lipoproteine wurden sowohl in lipidierter als auch in nicht-lipidierter Form als heterologe Proteine generiert, um den Einfluss der Lipidierung auf die Immunreaktion beurteilen zu können. Zur Untersuchung der Reaktion des menschlichen Immunsystems wurden humane Blut-Monozyten (hPBMCs) isoliert und zu pro-inflammatorischen Makrophagen (M1) einerseits und anti-inflammatorischen Makrophagen (M2a) andererseits differenziert. Die Zellen wurden mit den lipidierten bzw. nicht-lipidierten Proteinen stimuliert. In den Überständen wurden zur Beurteilung der abgelaufenen Immunreaktion die Konzentrationen von IL-1β, IL-2, IL-6, IL-8 und TNF bestimmt. Eine Produktion von IL-1β und IL-2 durch die Makrophagen konnte hierbei nicht nachgewiesen werden. M1 Makrophagen zeichneten sich durch eine kaum messbare Cytokin-Produktion auf beide Proteinstimuli aus. Anti-inflammatorische Makrophagen zeigten eine signifikant verstärkte IL-6, IL-8 und TNF Produktion (p< 0,05) nach Stimulation mit allen vier lipidierten Proteinen im Gegensatz zur Stimulation mit nicht-lipidierten Proteinen. Das stärkere Stimulationspotenzial der lipidierten Proteine konnte auf deren Agonismus am TLR2 zurückgeführt werden. Weiterhin konnte die starke Reaktion der M2a Makrophagen mit deren Plastizität sowie mit dem Potenzial von Lipoproteinen zur Umpolarisation von Makrophagen aufgrund des TLR2 Agonismus erklärt werden. Die Ergebnisse zeigen, dass die eingesetzten lipidierten Proteine einen suffizienten und signifikant potenteren Immunstimulus im menschlichen Organismus darstellen, als die gleichen Proteine in nicht-lipidierter Form. Somit könnten diese lipidierten Proteine geeignete Vakzinkandidaten gegen S. pneumoniae darstellen.
Streptococcus pneumoniaeinfections lead to high morbidity and mortality rates worldwide.Pneumococcal polysaccharide conjugate vaccines significantly reduce the burden of disease but havea limited range of protection, which encourages the development of a broadly protective protein-basedalternative. We and others have shown that immunization with pneumococcal lipoproteins that lackthe lipid anchor protects against colonization. Since immunity againstS. pneumoniaeis mediatedthrough Toll-like receptor 2 signaling induced by lipidated proteins, we investigated the effects ofa lipid modification on the induced immune responses in either intranasally or subcutaneouslyvaccinated mice. Here, we demonstrate that lipidation of recombinant lipoproteins DacB and PnrAstrongly improves their immunogenicity. Mice immunized with lipidated proteins showed enhancedantibody concentrations and different induction kinetics. The induced humoral immune responsewas modulated by lipidation, indicated by increased IgG2/IgG1 subclass ratios related to Th1-typeimmunity. In a mouse model of colonization, immunization with lipidated antigens led to a moderatebut consistent reduction of pneumococcal colonization as compared to the non-lipidated proteins,indicating that protein lipidation can improve the protective capacity of the coupled antigen. Thus,protein lipidation represents a promising approach for the development of a serotype-independentpneumococcal vaccine.