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Publisher
Previous research identified veterinary clinics as hotspots with respect to accumulation and spread of multidrug resistant extended-spectrum β-lactamase (ESBL)-producing Escherichia coli (EC). Therefore, promoting the prudent use of antibiotics to decrease selective pressure in that particular clinical environment is preferable to enhance biosecurity for animal patients and hospital staff. Accordingly, this study comparatively investigated the impact of two distinct perioperative antibiotic prophylaxis (PAP) regimens (short-term versus prolonged) on ESBL-EC carriage of horses subjected to colic surgery. While all horses received a combination of penicillin/gentamicin (P/G) as PAP, they were assigned to either the “single-shot group” (SSG) or the conventional “5-day group” (5DG). Fecal samples collected on arrival (t0), on the 3rd (t1) and on the 10th day after surgery (t2) were screened for ESBL-EC. All isolates were further investigated using whole genome sequences. In total, 81 of 98 horses met the inclusion criteria for this study. ESBL-EC identified in samples available at t0, t1 and t2 were 4.8% (SSG) and 9.7% (5DG), 37% (SSG) and 47.2% (5DG) as well as 55.6% (SSG) and 56.8% (5DG), respectively. Regardless of the P/G PAP regimen, horses were 9.12 times (95% CI 2.79–29.7) more likely to carry ESBL-EC at t1 compared to t0 (p < 0.001) and 15.64 times (95% CI 4.57–53.55) more likely to carry ESBL-EC at t2 compared to t0 (p < 0.001). ESBL-EC belonging to sequence type (ST) 10, ST86, ST641, and ST410 were the most prevalent lineages, with blaCTX–M–1 (60%) being the dominant ESBL gene. A close spatio-temporal relationship between isolates sharing a particular ST was revealed by genome analysis, strongly indicating local spread. Consequently, hospitalization itself has a strong impact on ESBL-EC isolation rates in horses, possibly masking differences between distinct PAP regimens. The results of this study reveal accumulation and spread of multi-drug resistant ESBL-EC among horses subjected to colic surgery with different P/G PAP regimens, challenging the local hygiene management system and work-place safety of veterinary staff. Moreover, the predominance of particular ESBL-EC lineages in clinics providing health care for horses needs further investigation.
Diese Arbeit war Teil eines vom Bundesministerium für Bildung und Forschung geförderten interdisziplinären Forschungsnetzwerks (#1HealthPREVENT) und stellte eine einmalige peri-operative antibiotische (Penicillin/Gentamicin (P/G)) Prophylaxe (PAP) im Zuge eines operativen Eingriffs nach diagnostizierter Kolik beim Pferd der bislang üblichen fünf-Tage-Antibiose gegenüber, mit dem Ziel den Einfluss der PAP auf die Häufigkeit von (engl.) Extended Spectrum β-Lactamase produzierenden Escherichia coli (ESBL-EC) und die Veränderungen im enteralen Mikrobiom der Pferde zu untersuchen und zur Verbesserung des sorgfältigen Einsatzes von Antibiotika in der Veterinärmedizin beizutragen. Die per Los jeweils einer der zwei Gruppen („single shot“ Gruppe (SSG); „5 days“ Gruppe (5DG)) zugeordneten Pferde wurden dafür jeweils an drei verschiedenen Zeitpunkten (Klinikaufnahme (t0), Tag 3 (t1) und Tag 10 (t2) postoperativ) beprobt (Kotproben und Nüsternabstriche). Zusätzlich zur Gruppe der hospitalisierten Pferde wurde auch eine nicht-hospitalisierte Kontrollgruppe ohne klinische Auffälligkeiten einbezogen. Alle Proben wurden hinsichtlich positiver ESBL-EC untersucht und die identifizierten Isolate phänotypisch (durchgeführt vom Institut für Mikrobiologie und Tierseuchen, Freie Universität Berlin) und genotypisch charakterisiert. Unabhängig vom P/G PAP-Schema stieg für die Pferde die Wahrscheinlichkeit von t0 zu t1 sowie von t0 zu t2 an, positiv für ESBL-EC zu sein. Die Ganzgenom-Sequenzierung der Isolate ergab außerdem eine enge räumliche und zeitliche Beziehung zwischen Isolaten mit gemeinsamen Sequenztypen, was auf eine lokale Ausbreitung hindeutete. Die 16S rRNA-Gen Sequenzierung der Kotproben (durchgeführt vom Institut für Klinische Molekularbiologie der Christian-Albrechts-Universität zu Kiel) zur Untersuchung der Veränderungen im enteralen Mikrobiom zeigte nach der bioinformatischen Aufbereitung (durchgeführt von Silver Anthony Wolf, Robert Koch-Institut) und Fach-übergreifenden Analyse eine Beeinträchtigung in der Zusammensetzung der fäkalen Mikrobiota (Alpha-Diversität) für Pferde mit akuter Kolik im Vergleich zur Kontrollgruppe, welche jedoch nicht signifikant war. Die mikrobielle Gesamtkomposition der untersuchten Proben (Beta-Diversität) wies vor allem für die 5DG an t1 erhebliche Einschränkungen auf, was höchstwahrscheinlich auf die fortlaufende Verabreichung von Antibiotika zurückzuführen war. In beiden Studiengruppen wurde zudem an t1 eine erhöhte Abundanz von Enterobacteriaceae, insbesondere Escherichia, festgestellt. Insgesamt wiesen die Ergebnisse dieser Arbeit einen starken Einfluss des Krankenhausaufenthaltes an sich auf, vor allem auf die ESBL-EC-Isolationsraten, wodurch möglicherweise Unterschiede zwischen den verschiedenen PAP-Behandlungen überdeckt wurden. Trotzdem stellen die in dieser Studie gesammelten Ergebnisse und gewonnenen Erkenntnisse einen ersten wichtigen Schritt in der Etablierung von Antibiotic Stewardship-Programmen in Pferdekliniken dar und könnten somit einen langfristigen Einfluss auf die lokale Verbreitung von ESBL-EC haben.