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Auch wenn für das fortgeschrittene HCC mittlerweile mehrere systemische Therapieansätze zur Verfügung stehen, kommt es bei vielen Patienten dennoch zu einem Progress der Erkrankung. Ein Problem stellt die Heterogenität des HCC dar. Es existieren verschiedene Subtypen des HCC, welche sich in ihren molekularen und chromosomalen Aberrationen, epigenetischen Modifikationen sowie auch ihrem Tumor-Mikromilieu unterscheiden. Gleichzeitig gibt es für die häufigsten Treibermutationen des HCC bisher keine geeigneten Inhibitoren. Dadurch erklärt sich das zum Teil nur geringe oder fehlende Ansprechen auf systemische Therapien, was die Suche nach weiteren Therapieansätzen nötig macht. FASN-Inhibitoren stellen dabei vielversprechende Kandidaten einer HCC-Therapie dar. Zum einen konnte eine Überexpression von FASN in mehreren Tumoren wie auch dem HCC nachgewiesen werden, die Expression im Normalgewebe und die damit zu vermuteten Nebenwirkungen sind sehr gering. Zum anderen sprechen mehrere präklinische Studien dafür, dass FASN eine wichtige Rolle in der Hepatokarzinogenese spielt. An Zellkulturen fand sich eine Apoptoseinduktion sowie verminderte Proliferation von hepatozellulären Tumorzellen durch FASN-Inhibitoren. Außerdem konnte in Tiermodellen unter Einsatz von FASN-Inhibitoren die Entstehung von HCC verhindert oder verzögert werden. In dem vorliegenden Modell der hormonell-induzierten Hepatokarzinogenese kommt es zur Entwicklung klarzelliger Herde, welche Präneoplasien darstellen und sich über Adenome in HCC entwickeln. Die in diesen klarzelligen Herden beschriebenen metabolischen Veränderungen sind der Hepatokarzinogenese auf dem Boden einer NASH sehr ähnlich und repräsentieren damit relativ gut einen Subtyp des HCC. Die Gabe von hochdosiertem Orlistat über eine Woche führte zu einer reduzierten Proliferationsaktivität der präneoplastischen Herde, eine erniedrigte Proliferation ließ sich jedoch auch in der zugehörigen Kontrollgruppe nachweisen, welche lediglich hochdosiert DMSO erhielt. Somit scheint die proliferationshemmende Wirkung in erster Linie über DMSO bedingt, eine Wirkung des FASN-Inhibitors Orlistat ist nicht sicher zu belegen. In der Literatur wird in Zellkulturen eine Wachstumshemmung bei hochdosierter DMSO-Gabe beschrieben. Des Weiteren führt DMSO bei einigen HCC-Zelllinien zu einer Ausreifung bzw. einem Verlust des malignen Phänotyps mit Herabregulierung u.a. der Fettsäuresynthese, was möglicherweise im vorliegenden Fall ebenfalls eine Rolle spielt. Mittlerweile stehen neue, im Gegensatz zu Orlistat oral verfügbare FASN-Inhibitoren zur Verfügung, außerdem wird daran gearbeitet, die orale Bioverfügbarkeit von Orlistat zu erhöhen. Die neuen FASN-Inhibitoren haben in Tiermodellen des HCC bereits vielversprechende Ergebnisse gezeigt. Dabei fand sich häufig ein synergistischer Effekt in Kombination mit anderen Chemotherapeutika. Letztendlich scheint die Gabe eines FASN-Inhibitors in Kombination mit einem anderen Therapeutikum sinnvoll, da präklinische Studien darauf hinweisen, dass es zu einer Resistenz gegenüber einer FASN-Inhibition durch eine Aktivierung anderer Signalwege kommen kann.

Background and Aims Hepatocellular ballooning is a common finding in chronic liver disease, mainly characterized by rarefied cytoplasm that often contains Mallory-Denk bodies (MDB). Ballooning has mostly been attributed to degeneration but its striking resemblance to glycogenotic/steatotic changes characterizing preneoplastic hepatocellular lesions in animal models and chronic human liver diseases prompts the question whether ballooned hepatocytes (BH) are damaged cells on the path to death or rather viable cells, possibly involved in neoplastic development. Methods Using specimens from 96 cirrhotic human livers, BH characteristics were assessed for their glycogen/lipid stores, enzyme activities, and proto-oncogenic signaling cascades by enzyme- and immunohistochemical approaches with serial paraffin and cryostat sections. Results BH were present in 43.8% of cirrhotic livers. Particularly pronounced excess glycogen storage of (glycogenosis) and/or lipids (steatosis) were characteristic, ground glass features and MDB were often observed. Decreased glucose-6-phosphatase, increased glucose-6-phosphate dehydrogenase activity and altered immunoreactivity of enzymes involved in glycolysis, lipid metabolism, and cholesterol biosynthesis were discovered. Furthermore, components of the insulin signaling cascade were upregulated along with insulin dependent glucose transporter glucose transporter 4 and the v-akt murine thymoma viral oncogene homolog/mammalian target of rapamycin signaling pathway associated with de novo lipogenesis. Conclusions BH are hallmarked by particularly pronounced glycogenosis with facultative steatosis, many of their features being reminiscent of metabolic aberrations documented in preneoplastic hepatocellular lesions in experimental animals and chronic human liver diseases. Hence, BH are not damaged entities facing death but rather viable cells featuring metabolic reprogramming, indicative of a preneoplastic nature.

Bei der Entstehung des hepatozellulären Karzinoms (HCC) nimmt das metabolische Syndrom zunehmend einen bedeutenden Risikofaktor ein. In diesem Zusammenhang konnte ein von F. Dombrowski et al. entwickeltes Tiermodell darstellen, dass nach intraportaler Pankreasinseltransplantation durch erhöhte Insulin- und Glukosekonzentrationen sehr frühe präneoplastische Läsionen in der Leber entstehen, die sich zu hepatozellulären Karzinomen weiterentwickelt haben. Dieses hormonelle Karzinogenesemodell konnte von S. Ribback et al. bereits erfolgreich auf die Maus übertragen und mit einem ChREBP-Knockoutmodell erweitert werden. In meiner Arbeit sollte die Häufigkeit dieser Leberherde im Mausmodell erhöht werden, um deren Signifikanz in der experimentellen Hepatokarzinogenese ermitteln zu können. Es konnte in dieser Arbeit eine präoperative subkutane Insulinbehandlung etabliert werden, um den Blutzucker innerhalb von fünf Tagen bei diabetischen WT- (C57BL/6J) und ChREBP-KO-Mäusen auf normoglykäme Werte zu halten. Das Ziel, die Häufigkeit präneoplastischer CCF in der Leber bei den WT-Mäusen zu erhöhen, konnte jedoch mit der subkutanen Insulintherapie nicht erreicht werden. Des Weiteren stellte sich die subkutane Insulintherapie aufgrund starker Blutzuckerschwankungen als eine ungeeignete Behandlungsmethode dar. Durch die Behandlung mit Insulinsticks konnte jedoch der Blutzuckerspiegel auf konstante Werte eingestellt werden. Damit konnte eine geeignete Methode gefunden werden, um die diabetischen Komplikationen für spätere Langzeitversuche zu minimieren und ein langes Überleben der Versuchstiere zu gewährleisten. In der Leber diabetischer ChREBP-KO-Mäuse entstanden spontane glykogenotische Veränderungen, die zuvor in dieser Form noch nicht beschrieben wurden, von kleinen herdförmigen Glykogenspeicherherden bis hin zu einer diffusen Glykogenose der Leber. Innerhalb dieser diffusen Glykogenose bestand eine leichte steatohepatitis-ähnliche Entzündung und es konnte eine gesteigerte Proliferationsaktivität nachgewiesen werden, was eine Tumorentstehung begünstigen könnte. ChREBP könnte daher, neben seinen bislang nachgewiesenen protoonkogenen Eigenschaften, auch tumorsuppressive Funktionen in der Leber haben.

GPR68 (OGR1) belongs to the proton-sensing G protein-coupled receptors that are involved in cellular adaptations to pH changes during tumour development. Although expression of GPR68 has been described in many tumour cell lines, little is known about its presence in human tumour entities. We characterised the novel rabbit monoclonal anti-human GPR68 antibody 16H23L16 using various cell lines and tissue specimens. The antibody was then applied to a large series of formalin-fixed, paraffin-embedded normal and neoplastic human tissue samples. Antibody specificity was demonstrated in a Western blot analysis of GPR68-expressing cells using specific siRNAs. Immunocytochemical experiments revealed pH-dependent changes in subcellular localisation of the receptor and internalisation after stimulation with lorazepam. In normal tissue, GPR68 was present in glucagon-producing islet cells, neuroendocrine cells of the intestinal tract, gastric glands, granulocytes, macrophages, muscle layers of arteries and arterioles, and capillaries. GPR68 was also expressed in neuroendocrine tumours, where it may be a positive prognostic factor, in pheochromocytomas, cervical adenocarcinomas, and endometrial cancer, as well as in paragangliomas, medullary thyroid carcinomas, gastrointestinal stromal tumours, and pancreatic adenocarcinomas. Often, tumour capillaries were also strongly GPR68-positive. The novel antibody 16H23L16 will be a valuable tool for basic research and for identifying GPR68-expressing tumours during histopathological examinations.

EGFR is overexpressed in the majority of clear cell renal cell carcinomas (CCRCCs). Although EGFR deregulation was found to be of great significance in CCRCC biology, the EGFR overexpression is not associated with EGFR-targeted therapy responsiveness. Moreover, the prognostic role of EGFR expression remains controversial. In the present study, we evaluated the role played by EGFR overexpression in CCRCC and its prognostic significance associated with different immunohistochemical localization patterns. In our study, the Total Score (TS) related to membranouscytoplasmic EGFR expression showed a significant correlation with grade, pathologic stage (pT), and Stage, Size, Grade, and Necrosis (SSIGN) score, and a negative correlation with nuclear EGFR expression. No significant correlations were shown between nuclear EGFR and clinic-pathological features. Additionally, a correlation between SGLT1 expression levels and pT was described. Multivariate analysis identifies pT and SSIGN score as independent prognostic factors for CCRCC. A significantly increased survival rate was found in the case of positive expression of nuclear EGFR and SGLT1. Based on our findings, SGLT1 and nuclear EGFR overexpression defines a subgroup of CCRCC patients with good prognosis. Membranous-cytoplasmic EGFR expression was shown to be a poor prognostic factor and could define a CCRCC subgroup with poor prognosis that should be responsive to anti-EGFR therapies